國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)布通告宣布，《化妝品中西咪替丁的檢測(cè)方法(高效液相色譜法)》(下稱：本方法)經(jīng)化妝品標(biāo)準(zhǔn)專家委員會(huì)全體會(huì)議審議通過。
本方法規(guī)定了高效液相色譜法測(cè)定化妝品中西咪替丁的含量，適用于膏霜乳液類、液態(tài)水基類、凝膠類、面膜類化妝品中西咪替丁含量的測(cè)定。
附件 化妝品中西咪替丁的檢測(cè)方法(高效液相色譜法)
1范圍
本方法規(guī)定了高效液相色譜法測(cè)定化妝品中西咪替丁的含量。
本方法適用于膏霜乳液類、液態(tài)水基類、凝膠類、面膜類化妝品中西咪替丁含量的測(cè)定。
2方法提要
樣品經(jīng)甲醇超聲提取后，采用高效液相色譜系統(tǒng)分離，二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)保留時(shí)間和紫外光譜圖定性，峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。必要時(shí)，采用液相色譜-質(zhì)譜法進(jìn)行確證。
本方法對(duì)西咪替丁的檢出限為8ng，定量下限為24ng;取樣量為1.0g時(shí)，檢出濃度為20μg /g，最低定量濃度為66μg /g。
3 試劑和材料
除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。
3.1 西咪替丁，純度≥99%。
3.2 乙腈，色譜純。
3.3 甲醇，分析純。
3.4 磷酸二氫鉀，分析純。
3.5 氨水，分析純，濃度為25-28%。
3.6 流動(dòng)相的配制：
流動(dòng)相A：乙腈(3.2)。
流動(dòng)相B：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液：稱取磷酸二氫鉀(3.4)6.8g，加水1000mL溶解，用氨水調(diào)pH值至7.0。
3.7 西咪替丁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：稱取西咪替丁標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)10mg(精確到0.00001g)于25 mL容量瓶中，用甲醇(3.3)溶解并定容至刻度。
4 儀器和設(shè)備
4.1 高效液相色譜儀，二極管陣列檢測(cè)器。
4.2 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀，電噴霧離子源。
4.3 天平。
4.4 超聲波清洗器。
5分析步驟
5.1 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備
取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(3.7)適當(dāng)量，分別用甲醇(3.3)配制成濃度為2、10、20、40、80μg /mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。
5.2 樣品處理
稱取樣品0.2—1.0 g(精確到0.001g)于25 mL比色管中，加入20.0 mL甲醇(3.3)，在渦旋混勻器上高速振蕩30s，使樣品與提取溶劑充分混勻。然后超聲提取20min，靜置至室溫，用甲醇(3.3)定容至刻度，搖勻，溶液經(jīng)0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液作為待測(cè)溶液。必要時(shí)用適量甲醇(3.3)稀釋。
5.3 參考色譜條件
色譜柱：C18柱(150mm×4.6mm×5μm)，或等效色譜柱;
流動(dòng)相梯度洗脫程序：
5.4 測(cè)定
在“5.3”色譜條件下，取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(5.1)進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
取“5.2”項(xiàng)下的待測(cè)溶液進(jìn)樣，根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間和紫外吸收光譜圖定性，測(cè)得峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)溶液中西咪替丁的濃度。按“6”計(jì)算樣品中西咪替丁的含量。
6分析結(jié)果的表述
6.1 計(jì)算
6.2 回收率和精密度
方法的平均回收率為88.8%～99.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于7%(n=6)。
7圖譜
附錄 A(規(guī)范性附錄)西咪替丁陽(yáng)性結(jié)果的確證
如檢出陽(yáng)性樣品，需經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜法進(jìn)行結(jié)果確證。
A.1 前處理過程見“5.2”。
A.2參考色譜條件
色譜柱：C18柱(150mm×2.1mm×1.9μm)，或等效色譜柱;
流動(dòng)相：
流動(dòng)相A：乙腈
流動(dòng)相B：含0.02mol/L醋酸銨的0.1%乙酸溶液
流動(dòng)相梯度洗脫程序：
A.3 參考質(zhì)譜條件
離子源：電噴霧離子源(ESI);
掃描方式：正離子掃描;
干燥氣：N2;
離子源溫度：120 ℃;
干燥氣溫度：350 ℃;
A.4定性判定
在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，如果樣品中檢出組分的色譜峰的保留時(shí)間與西咪替丁標(biāo)準(zhǔn)溶液一致，所選擇的監(jiān)測(cè)離子的相對(duì)豐度比與相當(dāng)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇監(jiān)測(cè)離子相對(duì)豐度比的偏差不超過表A.1規(guī)定范圍，則可以判定樣品中存在西咪替丁組分。
A.5 圖譜
